一些細胞和組織可在懸浮狀態(tài)下生長,,但相當一部分哺乳動物細胞需要表面貼壁,。
用于提供細胞體外培養(yǎng)環(huán)境的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿除了具有良好的透明度和無毒,、無菌外,,還需經表面改性處理使之能夠貼壁、分裂和生長,。
培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿的區(qū)別
培養(yǎng)瓶適合長期培養(yǎng),、傳代、作為種子細胞,。
不易污染,。
培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板適合在各種實驗中選用,臨時培養(yǎng),。
培養(yǎng)面積T25約為25,,T75為75。
6孔板,、10/孔,。
12孔板4/孔。
培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿的區(qū)別在于,,安全系數的高低,、培養(yǎng)細胞數量的多少。
個人感覺培養(yǎng)瓶的安全系數更高,,操作也比較方便,。
培養(yǎng)瓶瓶可以用來做相對大規(guī)模的培養(yǎng)或比較容易被污染的細胞。
而培養(yǎng)皿比較適合小規(guī)模的培養(yǎng)或做一些對照分析實驗,。

細胞在細胞培養(yǎng)瓶長成致密單層后,,已基本上飽和,,為使細胞能繼續(xù)生長,也將細胞數量擴大,,就必須進行傳代(再培養(yǎng)),。
傳代培養(yǎng)也是一種將細胞保存下去的方法。
也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經過程,。
懸浮性細胞直接分瓶就可以,,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。
具體操作步驟如下:
將長滿細胞的細胞培養(yǎng)瓶中原來的培養(yǎng)液棄去,。
加入0.5—1ml 0.25%胰酶溶液,,使瓶底細胞都浸入溶液中。
瓶口塞好橡皮塞,,放在倒置鏡下觀察細胞,。
隨著時間的推移,原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,,在還未漂起時將胰酶棄去,,加入10ml培養(yǎng)液終止消化。
觀察消化也可以用肉眼,,當見到瓶底發(fā)白并出現細針孔空隙時終止消化,。
一般室溫消化時間約為1—3分鐘。
用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液,,分到兩到三瓶中,,實踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞,置37℃下繼續(xù)培養(yǎng),。
第二天觀察貼壁生長情況,。
以上是細胞培養(yǎng)瓶在細胞傳代中的應用,消化液的配制方法如下:稱取0.25克胰酶蛋白酶(活力為1:250),,加入100ml無Ca2+、Mg2+的Hank’s液溶解,,濾器過濾除菌,,4℃保存,用前可在37℃下回溫,。
胰酶溶液中也可加入EDTA,,使終濃度達0.02%。

細胞培養(yǎng)瓶特征
厚度均勻,,底部無畸變,;
密封蓋/濾膜蓋(0.22μm疏水膜);
設計的瓶蓋可快速旋轉,;
側面可疊放,,更有效地利用培養(yǎng)箱,;
無毒,無DNA/RAN酶,;
伽馬射線消毒滅菌,。

培養(yǎng)瓶主要分類
按細胞對產品的貼壁要求分為三類:
普通型適合細胞和組織的懸浮培養(yǎng);
標準型具有良好的細胞貼壁性能,,適用于細胞的貼壁生長,;
型表面含有含氮官能團,能促進某些細胞(如細胞)的貼壁,、生長和分化,。
按瓶子外形分為:
寬體培養(yǎng)瓶;
三角培養(yǎng)瓶,;
斜頸培養(yǎng)瓶,。
我們公司將繼續(xù)堅持“產業(yè)報國”的企業(yè)精神,不斷加強人才隊伍建設,、建設,、推進技術創(chuàng)新、管理創(chuàng)新,,為我國儀器行業(yè)的發(fā)展及“中國制造2025”的實現,,做出不懈努力!